精宏鼓風干燥箱對膝骨性關節炎家兔關節滑膜組

來源：未知發布日期：2019-09-09 09:39【大中小】

骨性關節炎( OA) 是骨傷科最常見的疾病，隨著我國人口老齡化趨勢加速，骨性關節炎的患者也逐年增加，其中膝關節是骨性關節炎最常見最多發病的部位。隨著病情發展，引起的直接后果就是活動受限，喪失勞動力，嚴重者可導致殘廢。蒙藥森登－ 4 味湯由文冠木、訶子、梔子、川楝子等藥味組成，有著清熱燥黃水的功能，主治痛風、痹病、關節黃水病、關節水腫等，在臨床上廣泛用于治療關節炎及水腫等病癥。

1 材料

1. 1 動物

健康成年家兔 70 只，清潔級，雌雄不限，體質量( 2. 5 ± 0. 2) kg，由長春億斯實驗動物技術有限公司提供，實驗動物許可證號: SCXK( 吉) 2016 － 001。適應性喂養 1 周。

1. 2 藥品與試劑

森登－ 4 味湯: 由文冠木、訶子、梔子、川楝子等藥味組成，內蒙古民族大學附屬醫院制劑室制備成散劑，加 50 mL 蒸餾水制成混懸液備用。白介素－ 1β、腫瘤壞死因子－ α、轉化生長因子－ βELISA 檢測試劑盒: 上海源葉生物技術有限公司; 戊巴比妥鈉: 上海化學試劑有限公司。

1. 3 主要儀器

AUY － 120 電子天平( max 201g d = 0. 01mg) : 日本島津公司; TG16 － WS 臺式離心機: 長沙湘瑞離心機有限公司; DY89 － 1 電動勻漿機: 寧波電子科技有限公司; Sunrise M7. 2 型多功能酶標儀: 美國 Molecular Devices; 上海精宏DHG-9140A恒溫干燥箱: 上海精宏實驗設備有限公司; 冰箱: 青島海爾公司。

2 方法

80 只成年家兔恒溫恒濕條件下適應性喂養 7 d 后，隨機選取 64 只家兔采用改良 Hulth 法進行動物模型制造，其余 16 只做正常對照組。實驗家兔稱重，編號，用 30 g /L 戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉( 30 mg / kg) 后，將兔固定于手術臺上，雙膝伸直位。常規剃毛、消毒、鋪巾。于兔右側膝關節髕內側作長約 2. 5 cm 的縱行皮膚切口，切斷內側副韌帶，完整摘除內側半月板，切斷前交叉韌帶。建模時注意保護關節軟骨面不受損傷; 徹底止血，逐層縫合，常規消毒包扎。術后 1 周肌注青霉素 40 萬 U / d，以防感染。之后進行每天 3 次驅趕，每次驅趕時間至少 30 min，4 周后經檢查關節軟骨面粗糙、軟骨外觀呈灰黃色、無正常透明度及光澤可見明顯缺損及骨贅形成，顯示動物模型制造成功。將成模大鼠隨機分為 4 組，模型組和森登－ 4 味湯高( 45 mg / kg) 、中( 30 mg / kg) 、低劑量( 15 mg / kg) 組，每組 16 只，各組給予相應計量灌胃給藥，模型組、正常組蒸餾水灌胃，每天 1 次，連續給藥 28 d。末次給藥后 24 h，處死( 空氣栓塞法) 家兔，在無菌條件下，用剪刀自股骨下段及脛骨上段分別剪取完整膝關節，切開關節，顯露膝關節腔，肉眼觀察關節軟骨的顏色、光澤、光滑度、滑膜充血腫脹等情況，然后取關節滑膜組織，進行組織勻漿，用酶聯免疫法檢測白細胞介素( IL － 1β) 、腫瘤壞死因子( TNF － α) 、轉化生長因子( TGF － β) 含量，操作嚴格按試劑盒說明進行。

3 結果

正常對照組家兔隨飼養時間的增長，精神狀態良好，被毛光澤，行動自如，無異常狀態。造模成功家兔精神萎靡，不喜活動，進食及飲水量均減少，被毛干枯且無光澤，活動量明顯減少; 膝關節出現輕微的炎癥反應及關節部位出現腫脹，陸續出現出現關節全部水腫且伴有關節活動功能障礙情況，出現關節紅腫和軟組織腫脹，隨之逐漸消退，關節部位僵硬，活動明顯受限，不愛活動。森登－ 4 味湯給藥組較模型組病情有所好轉，進食及飲水均增加，體質量有所增加，精神狀態良好，被毛變光澤，行動轉好。

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